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【DEN酶百科】走进历史探索溶菌酶研究之路

时间: 2025-01-06 13:58:37 |   作者: 卧式干燥机

  作为酶类抗菌药,溶菌酶能参与黏多糖的代谢,如配合内服与外用药,可使其对微生物的感染发挥出更强的消炎作用。

  溶菌酶(英文名称:Lysozyme,又译溶解酶)是一个分子量为14.4kDa的酶,它经由催化肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基间和壳糊精中N-乙酰葡糖胺残基间的1,4-β链的水解,而破坏细菌的细胞壁。

  1909年,拉希琴科(Laschtschenko)指出,鸡卵白有强抑菌作用,是酶作用的结果。

  1922年,弗莱明(Alexander Fleming)发现人的鼻涕、唾液、眼泪也有强力的溶菌活性,并把其溶菌作用的因子命名为溶菌酶。

  1923年,中村指出,溶菌酶的溶菌活性极弱时,在作用底物中加入碱,作用底物便迅速呈透明状态。人们清楚了溶菌酶对非敏感的沙门氏菌和布鲁氏菌等革兰氏阴性菌能产生溶菌的原因。

  1936年,麦耶(Meyer)发表了精致溶菌酶的报告,获得了溶菌酶结晶状标准品。不过,质量和收率仍不理想。

  1945年,奥尔德顿(Abraham)等人用精致酶的新方法,即用膨土岩吸附,再用吡啶溶出,从鸡卵白中得到了收率高、结晶好的溶菌酶。

  同年,乔丽斯(Jolles)等人从家兔脾脏中,得到了两种溶菌酶纯化结晶品。

  1951年,索尔顿(Salton)等人用极近似自然形态的微生物,如巨大芽孢杆菌、溶壁微球菌、藤黄八叠球菌等,成功制备了细胞壁,并观察了细胞壁在溶菌酶作用下完全溶解的情况,从而证明溶菌酶是细菌细胞壁的溶解酶。

  1959—1963年,索尔顿、古伊森、让洛兹等人终于清楚了溶菌酶是一种能够切断N-乙酰牧氨酸和N-乙酰葡聚糖胺之间的β-1,4-键的酶。

  贝格尔进一步研究后指出,溶菌酶能分解甲壳质,并命名为内-β-1,4-N-乙酰己糖胺酶。

  1965年,大卫·菲利浦用X射线衍射技术探讨研究溶菌酶晶体,解析出了2埃分辨率的晶体结构。这是第二个使用X射线衍射技术获得的蛋白质结构,也是第一个解析出的酶结构。大卫·菲利浦根据次结构提出了溶菌酶催化的机理,该催化机理最近得到了修正。

  1966年,奥瑟曼(Osserman)等人报道,在慢性单核细胞性白血病患者的尿中,含有大量(500mg/日)的溶菌酶。临床医学专家们发现在检测白血病、肾功能衰竭或其他病患者的血清、尿中溶菌酶的活性,在临床上可有效地诊断白血病。

  · 某些癌细胞会分泌过量的溶菌酶,导致血液中溶菌酶含量过高,造成肾衰竭和低血钾。

  溶菌酶是一种有效的抗菌剂,能切断肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和N-乙酰胞壁酸(NAM)之间的β-l,4糖苷键之间的联结,破坏肽聚糖支架,在内部渗透压的作用下细胞胀裂开,引起细菌裂解。

  人和动物细胞无细胞壁结构亦无肽聚糖,故溶菌酶对人体细胞无毒性作用,但具有溶解细菌细胞壁的能力。

  溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

  作为酶类抗菌药,溶菌酶能参与黏多糖的代谢,如配合内服与外用药,可使其对微生物的感染发挥出更强的消炎作用。

  作为机体非特异免疫因子之一,溶菌酶参与机体多种免疫反应,改善和增强巨噬细胞吞噬和消化功能,激活其他白细胞吞噬功能,从而增强机体的抵抗力。临床上大范围的使用在副鼻窦炎、咽喉炎、扁平疣等的治疗。还可用于预防和治疗病毒性肝炎,尤其对输血后肝炎及急性肝炎的效果较为明显。另外,人体溶菌酶还可作为多种疾病的诊断指标。

  溶菌酶作为一种无毒、无副作用安全性很高的天然蛋白质,成为食品防腐剂和营养保健品的优选对象。现已应用于如水产品、乳制品、肉食品、糕点、料酒、清酒及饮料等产品。

  溶菌酶的杀菌属于冷杀菌,因此能避免高温杀菌对食品营养和风味的破坏作用,适用于巴氏杀菌,能延续保质期。

  另外,还能添加入乳粉中,使牛乳人乳化,以抑制肠道中腐败微生物的生存,同时直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖。

  科学家认为,处在良好状态的运动员其唾液溶菌酶的滴定值高于训练水平不佳的运动员,训练负荷增大能使运动员溶菌酶的滴定值下降;溶菌酶是构成机体非特异性免疫功能的因素之一,在某些特定的程度上能反映机体的免疫能力,是一项较灵敏的亚临床指标,可用以评价运动员的身体机能。

  测定唾液溶菌酶的方法简单易行,便于较久追踪观察,有助于在训练和恢复期进行机能评定。

  溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能,以溶菌酶处理革兰氏阳性细菌可得到原生质体,因此溶菌酶是基因工程、细胞工程、发酵工程必不可少的工具酶。

  国外多用于菌体内容物质的提取,只要把对溶菌酶敏感的菌体悬液在适当缓冲液中用溶菌酶处理,再结合使用超声波、冷冻离心等手段,就可得到无细胞提取液,进一步精制,可得到所需的菌体物质。

  溶菌酶广泛应用于牙膏行业和漱口液的生产中,目前在我国已经生产出含有溶菌酶的漱口液和牙膏,研究表明这种产品可有效防治龋齿的发生。国外化妆品中含有海洋溶菌酶,其在化妆品中具有抑菌的作用。

  同时含有溶菌酶的日化产品也开始在国内生产,将溶菌酶替代传统的防腐剂,有很大效果预防细菌增殖,全面呵护家人及婴幼儿健康。

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